เมื่อพูดถึงการสกัดกรดนิวคลีอิกหนึ่งในคำถามที่พบบ่อยที่สุดเราในฐานะผู้จัดหาสารสกัดมักจะถูกถามคือ: "ฉันควรใช้เครื่องสกัดเปียกเมื่อไหร่และเมื่อใดที่ฉันควรใช้เครื่องสกัดแห้งเมื่อใด" การทำความเข้าใจการใช้งานที่เหมาะสม - กรณีสำหรับตัวแยกแต่ละประเภทเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการบรรลุผลที่ถูกต้องมีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้ในการตั้งค่าห้องปฏิบัติการและการวิจัยต่างๆ
สารสกัดเปียก: พื้นฐาน
สารสกัดเปียกหรือที่รู้จักกันในชื่อสารสกัดจากของเหลวนั้นใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการหลายแห่ง สารสกัดเหล่านี้พึ่งพารีเอเจนต์ของเหลวเพื่อสลายเซลล์ปล่อยกรดนิวคลีอิกและชำระให้บริสุทธิ์จากส่วนประกอบของเซลล์อื่น ๆ
พวกเขาทำงานอย่างไร
โดยทั่วไปกระบวนการเกี่ยวข้องกับหลายขั้นตอน ก่อนอื่นตัวอย่างจะผสมกับบัฟเฟอร์ lysis ซึ่งมีสารเคมีที่แตกเปิดเยื่อหุ้มเซลล์และโปรตีน denature สิ่งนี้จะปล่อยกรดนิวคลีอิกลงในสารละลาย จากนั้นผ่านขั้นตอนการผูกมัดการซักและการชะล้างออกไปกรดนิวคลีอิกจะถูกแยกออกจากสารปนเปื้อนอื่น ๆ ตัวอย่างเช่นลูกปัดแม่เหล็กสามารถใช้ในวิธีการสกัดแบบเปียก ลูกปัดแม่เหล็กมีพื้นผิวที่สามารถเลือกผูกกับกรดนิวคลีอิกได้ หลังจากการผูกมัดแม่เหล็กจะถูกใช้เพื่อแยกลูกปัดด้วยกรดนิวคลีอิกที่แนบมาจากส่วนที่เหลือของสารละลาย จากนั้นลูกปัดจะถูกล้างเพื่อกำจัดสิ่งเจือปนที่เหลืออยู่และในที่สุดกรดนิวคลีอิกจะถูกชะออกจากลูกปัดไปสู่สารละลายที่สะอาด
การใช้งานในอุดมคติ - กรณี
- ตัวอย่างระดับเสียงสูง: สารสกัดเปียกนั้นดี - เหมาะสำหรับการประมวลผลตัวอย่างจำนวนมาก เนื่องจากพวกเขาทำงานกับรีเอเจนต์ของเหลวจึงค่อนข้างง่ายในการขยายกระบวนการสกัด ตัวอย่างเช่นในห้องปฏิบัติการวินิจฉัยทางคลินิกที่ต้องการทดสอบตัวอย่างผู้ป่วยหลายร้อยตัวอย่างต่อวันเครื่องสกัดแบบเปียกสามารถจัดการปริมาณงานที่สูงได้อย่างมีประสิทธิภาพ
- ตัวอย่างที่ซับซ้อน: ตัวอย่างที่อุดมไปด้วยโปรตีนไขมันหรือโมเลกุลชีวภาพที่ซับซ้อนอื่น ๆ สามารถได้รับประโยชน์จากวิธีการสกัดแบบเปียก รีเอเจนต์ของเหลวสามารถทำลายส่วนประกอบที่ซับซ้อนเหล่านี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพและแยกกรดนิวคลีอิก ตัวอย่างเช่นเมื่อสกัดกรดนิวคลีอิกจากตัวอย่างเนื้อเยื่อซึ่งมักจะมีเมทริกซ์ extracellular จำนวนมากและเศษซากเซลล์สารสกัดเปียกสามารถให้ผลลัพธ์ที่ดีกว่าเมื่อเทียบกับวิธีการสกัดแบบแห้ง
- งานวิจัยที่ต้องการกรดนิวคลีอิกที่มีคุณภาพสูง: ในการตั้งค่าการวิจัยที่กรดนิวคลีอิกที่มีคุณภาพสูงเป็นสิ่งจำเป็นเช่นการศึกษาจีโนมหรือ transcriptomics สารสกัดเปียกมักเป็นตัวเลือกที่ต้องการ กระบวนการทำให้บริสุทธิ์หลายขั้นตอนในการสกัดแบบเปียกสามารถกำจัดสารปนเปื้อนที่หลากหลายส่งผลให้กรดนิวคลีอิกมีความบริสุทธิ์และความสมบูรณ์สูง
เครื่องสกัดแห้ง: ภาพรวม
ในทางกลับกันเครื่องสกัดแบบแห้งใช้วิธีการที่แตกต่างกัน แทนที่จะพึ่งพารีเอเจนต์ของเหลวตลอดกระบวนการทั้งหมดพวกเขามักจะใช้เมทริกซ์แห้งหรือวิธีการสกัดเฟสของแข็ง
พวกเขาทำงานอย่างไร
โดยทั่วไปแล้ววิธีการสกัดแบบแห้งจะเกี่ยวข้องกับการใช้ตัวอย่างกับเมทริกซ์แห้งเช่นกระดาษกรองหรือคอลัมน์ที่ใช้เรซิ่น เมทริกซ์มีคุณสมบัติเฉพาะที่อนุญาตให้ผูกกับกรดนิวคลีอิก หลังจากนำตัวอย่างมาใช้แล้วจะมีการดำเนินการขั้นตอนการซักชุดซึ่งมักจะมีบัฟเฟอร์ปริมาณเล็กน้อย ในที่สุดกรดนิวคลีอิกจะถูกชะออกจากเมทริกซ์ สารสกัดแห้งบางตัวยังใช้ความร้อนหรือวิธีการทางกายภาพอื่น ๆ เพื่ออำนวยความสะดวกในกระบวนการสกัด
การใช้งานในอุดมคติ - กรณี
- งานภาคสนามและจุด - ของ - การทดสอบการดูแล: สารสกัดแห้งเป็นแบบพกพาสูงและต้องการอุปกรณ์น้อยที่สุด สิ่งนี้ทำให้เหมาะสำหรับการใช้งานภาคสนามหรือจุด - การทดสอบการดูแล ตัวอย่างเช่นในการตรวจสอบด้านสิ่งแวดล้อมซึ่งต้องมีการรวบรวมและวิเคราะห์ตัวอย่างบนไซต์สารสกัดแห้งสามารถขนส่งและใช้งานได้ง่ายโดยไม่จำเป็นต้องติดตั้งห้องปฏิบัติการขนาดใหญ่
- ต่ำ - ตัวอย่างระดับเสียง: เมื่อจัดการกับตัวอย่างจำนวนเล็กน้อยสารสกัดแห้งจะมีประสิทธิภาพมากขึ้น พวกเขาสามารถรวมกรดนิวคลีอิกจากตัวอย่างจำนวนเล็กน้อยลงบนเมทริกซ์แห้งทำให้ง่ายต่อการตรวจจับและวิเคราะห์กรดนิวคลีอิก ตัวอย่างเช่นในวิทยาศาสตร์ทางนิติวิทยาศาสตร์ซึ่งอาจมีวัสดุทางชีวภาพเพียงเล็กน้อยเท่านั้นสามารถใช้สารสกัดแบบแห้งเพื่อสกัดกรดนิวคลีอิกได้อย่างมีประสิทธิภาพ
- การทดสอบอย่างรวดเร็ว: วิธีการสกัดแบบแห้งโดยทั่วไปจะเร็วกว่าวิธีการสกัดแบบเปียก เนื่องจากพวกเขาเกี่ยวข้องกับขั้นตอนที่น้อยลงและการจัดการของเหลวน้อยลงกระบวนการสกัดสามารถทำได้ในเวลาที่สั้นลง สิ่งนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในสถานการณ์ที่จำเป็นต้องมีผลลัพธ์อย่างรวดเร็วเช่นในการทดสอบการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วสำหรับโรคติดเชื้อ
การเปรียบเทียบระหว่างสารสกัดแบบเปียกและแห้ง
- ค่าใช้จ่าย: ในแง่ของค่าใช้จ่ายสารสกัดเปียกมักจะต้องใช้สารรีเอเจนต์ของเหลวอย่างต่อเนื่องซึ่งอาจมีราคาค่อนข้างแพงเมื่อเวลาผ่านไป ในทางกลับกันสารสกัดแห้งอาจมีค่าใช้จ่ายล่วงหน้าสูงกว่าสำหรับเมทริกซ์หรือคอลัมน์แห้ง แต่ค่าใช้จ่ายระยะยาวอาจต่ำกว่าโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการใช้งานระดับต่ำ
- ใช้งานง่าย: เครื่องสกัดแห้งมักจะใช้งานง่ายโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับผู้ใช้ที่ไม่ใช่ผู้เชี่ยวชาญ พวกเขาต้องการการจัดการของเหลวที่ซับซ้อนน้อยลงและสามารถดำเนินการกับการฝึกอบรมน้อยที่สุด เครื่องสกัดแบบเปียกในขณะที่มีความหลากหลายมากขึ้นอาจต้องใช้ความเชี่ยวชาญด้านเทคนิคมากขึ้นในการทำงานโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อต้องรับมือกับตัวอย่างปริมาณสูงหรือตัวอย่างที่ซับซ้อน
- ประสิทธิภาพการสกัด: โดยทั่วไปแล้วสารสกัดแบบเปียกจะมีประสิทธิภาพในการสกัดที่สูงขึ้นสำหรับตัวอย่างขนาดใหญ่และซับซ้อน อย่างไรก็ตามสารสกัดแบบแห้งสามารถบรรลุผลลัพธ์ที่เปรียบเทียบได้สำหรับตัวอย่างขนาดเล็กและง่ายโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อมันมาถึงการทดสอบอย่างรวดเร็ว
คำแนะนำผลิตภัณฑ์ของเรา
ในฐานะผู้จัดหาสกัดเรานำเสนอสารสกัดที่หลากหลายเพื่อตอบสนองความต้องการที่แตกต่างกัน หนึ่งในผลิตภัณฑ์ยอดนิยมของเราคือเครื่องมือสกัดกรดนิวคลีอิกอัตโนมัติ T16- เครื่องมือนี้รวมข้อดีของวิธีการสกัดทั้งแบบเปียกและแบบแห้ง มันสามารถจัดการตัวอย่างหลากหลายประเภทตั้งแต่ตัวอย่างนิติวิทยาศาสตร์ขนาดเล็กไปจนถึงตัวอย่างทางคลินิกขนาดใหญ่ - ปริมาตร ด้วยเทคโนโลยีขั้นสูงมันสามารถบรรลุการสกัดกรดนิวคลีอิกที่มีคุณภาพสูงด้วยประสิทธิภาพสูงและการทำซ้ำ
ไม่ว่าคุณจะเป็นห้องปฏิบัติการวิจัยที่กำลังมองหาโซลูชันปริมาณงานที่สูงสำหรับตัวอย่างที่ซับซ้อนหรือทีมงานที่ต้องการอุปกรณ์สกัดแบบพกพาและรวดเร็วเรามีตัวแยกที่เหมาะสมสำหรับคุณ ทีมผู้เชี่ยวชาญของเราพร้อมที่จะให้คำแนะนำอย่างมืออาชีพและการสนับสนุนเพื่อช่วยให้คุณเลือกตัวแยกที่เหมาะสมที่สุดสำหรับแอปพลิเคชันเฉพาะของคุณ
บทสรุป
โดยสรุปการเลือกระหว่างเครื่องสกัดเปียกและตัวแยกแห้งขึ้นอยู่กับปัจจัยต่าง ๆ รวมถึงลักษณะของตัวอย่างปริมาณงานที่จำเป็นทรัพยากรที่มีอยู่และข้อ จำกัด ด้านเวลา โดยการทำความเข้าใจลักษณะและการใช้งานในอุดมคติ - กรณีของตัวแยกแต่ละประเภทคุณสามารถตัดสินใจได้อย่างชาญฉลาดซึ่งจะทำให้มั่นใจได้ถึงความสำเร็จของการทดลองสกัดกรดนิวคลีอิกของคุณ
หากคุณมีความสนใจในการเรียนรู้เพิ่มเติมเกี่ยวกับสารสกัดของเราหรือมีคำถามใด ๆ เกี่ยวกับการเลือกตัวแยกที่เหมาะสมสำหรับความต้องการของคุณเราขอแนะนำให้คุณติดต่อเรา ทีมขายเฉพาะของเรากระตือรือร้นที่จะมีส่วนร่วมในการอภิปรายการจัดซื้อจัดจ้างกับคุณและช่วยให้คุณค้นหาทางออกที่ดีที่สุดสำหรับห้องปฏิบัติการหรือข้อกำหนดการวิจัยของคุณ
การอ้างอิง
- Sambrook, J. , & Russell, DW (2001) การโคลนนิ่งโมเลกุล: คู่มือห้องปฏิบัติการ สำนักพิมพ์ห้องปฏิบัติการ Cold Spring Harbour
- Van Ness, J. , & Chen, E. (2010) วิธีการสกัดกรดนิวคลีอิก ในเทคนิคชีววิทยาโมเลกุล (หน้า 1 - 20) Humana Press